广东阳光生物│突破Hp微需氧难题 成功实现Hp液体培养

通过胃镜钳取胃黏膜作 Hp培养是Hp感染最特异的诊断方法，敏感性和特异性都较高，分别可达98% 和100%,被作为验证其它诊断试验的金标准。但是 ,由于Hp培养操作技术较难,即使是有经验的实验师操作 ,成功率也仅达75%～95%[1]。目前,由于各种条件的限制,我国Hp培养主要在大学附属医院和科研机构进行,这使许多医院不能进行Hp的药敏测试导致临床上治疗Hp感染时，多凭临床经验选择抗生素,有较大的盲目性[6]。

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Hp难培养原因

灶性分布导致采样困难

研究发现Hp在人胃内呈局灶性、不均匀分布, 导致采集含有Hp的胃黏膜标本难度增加。另外，一般近期未用抗Hp药物的病人Hp多分布于距幽门2~5cm处的胃窦部, 用药的Hp会从胃窦转移到胃体、胃底[3]。因此，通常在胃窦、胃角、胃体等部位采样2-3块，以提高阳性培养率。

易受外在因素影响

尤其是培养温度和药物对Hp影响较大，Hp最适生长温度为37℃，低于27℃或高于42℃均不生长[2,3]，温度低于20℃很快会球形化失活。患者在进采集胃黏膜进行Hp培养近一个月内使用过作用于胃部的药物均会影响Hp的阳性培养率。研究发现同消化道病种Hp分离培养阳性率不同：近4周用抗Hp药物(包括奥美拉唑)的低于未用药。另外，病人在作胃镜检查时吞服麻醉药、胃镜沾有消毒液都会降低 Hp分离培养阳性率[3]。

生长条件要求苛刻

Hp是一种生存生长条件都非常苛刻的细菌,对培养基及培养条件要求很高,普通的培养基上不生长。Hp属于严格的微需氧菌，氧气低于2%或高于8%均不生长，一般需要特殊培养设备为其生长提供5％O2、10％CO2、85％N2，有些地区还要加5％H2，湿度约为90％的生长环境 [2,3]。

需要特殊贵重培养设备

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用于Hp培养的设备有：三气培养箱、抽换气厌氧培养箱、CO2培养箱、产气袋、产气盒等。其培养效果取决于气体、湿度、温度是否最适宜Hp生长[3]，而培养效果最好的就是三气培养箱，但价格昂贵且难购买到。

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Hp培养现状

Hp的培养基一般分为固体培养基和液体培养基两种，大多数实验室都采用固体培养基来分离筛选胃活检组织中的Hp。但固体培养需要将胃粘膜组织剪碎或者磨碎处理之后再涂布到平板上[4]，并且需要为Hp生长提供微需氧的环境。而微需氧培养罐、三气培养箱进口及国内价格均较贵，且因需求量少而难以购买；产气盒和产气袋二种培养容器密封性不好，很难维持一个微需氧环境，进而导致Hp培养难度增加[6]。Hp若要进行扩大培养，液体培养基也是必不可少的。在液体培养基上培养 Hp比较复杂，其培养成功与否主要取决于气体能否在培养基中充分弥散[5]。

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阳光生物Hp液体培养基

广东阳光生物生产的Hp培养测定药敏检测试剂盒则成功实现了Hp的液体培养，并且具备以下优势：

❖ 操作简便：胃黏膜组织无需处理，直接放入液体培养基中即可完成接种。

❖ 无需贵重仪器：液体培养基中加入无机盐在Hp生长过程中不断释放出各种气体，模拟三气培养箱的微环境，为Hp生长提供合适的生长环境，普通恒温培养箱即可培养。

❖ 缩短培养时间：通常3-5d即可培养成功，而以往HP固体培养法需要 3～7d[7]。

❖ 无需专业人员：无需专业人员仅内镜室医生即可操作，并根据培养基颜色变化进行判断。

参考文献：

1.石乐琴,等. 微生物学免疫学进展, 2007,35(3):51-68.

2.胡伏莲,等. 北京:中国科学技术出版社,2002:240.

3.张帅清. 中国卫生检验杂志,2007,17(4):759-760.

4.毛德超,等. 检验医学与临床,2019,16(10):1417-1419.

5.傅爽,等. 中国卫生检验杂志,2012(6):267-268+271.

6.张丽花. 中国民族民间医药杂志,2013.

7.龚燕芳,等. 第二军医大学学报,2001(4):95-96.返回搜狐，查看更多